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m7G RNA甲基化測(cè)序服務(wù)

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m7G RNA甲基化測(cè)序服務(wù)

英拜生物可為客戶提供m7G meRIP-seq、 m7G TRAC-Seq測(cè)序服務(wù)，在轉(zhuǎn)錄水平全面研究tRNA, mRNA發(fā)生m7G的片段或位點(diǎn)。

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產(chǎn)品詳細(xì)

m⁷G甲基化（N7-甲基鳥苷）是存在于tRNA、rRNA和mRNA 5’cap中最豐富的修飾之一，在調(diào)控RNA加工、代謝和功能方面具有重要作用。除了存在于mRNA 5’帽子位置，最近Cell、Mol Cell等雜志文章研究表明m⁷G也存在于mRNA內(nèi)部區(qū)域^【1,2】，m⁷G作為一種新的表觀轉(zhuǎn)錄組修飾在mRNA翻譯過程具有重要調(diào)節(jié)作用。英拜生物可為客戶提供m⁷G meRIP-seq、 m⁷G TRAC-Seq測(cè)序服務(wù)，在轉(zhuǎn)錄水平全面研究tRNA, mRNA發(fā)生m⁷G的片段或位點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)流程

研究案例
一、QKI將內(nèi)部發(fā)生m⁷G修飾的轉(zhuǎn)錄本送入應(yīng)激顆粒并調(diào)節(jié)mRNA代謝(Cell,2023)
研究人員發(fā)現(xiàn)mRNA內(nèi)部的m⁷G可被Quaking蛋白（QKIs）選擇性地識(shí)別。通過m⁷G meRIP-seq、RIP-Seq篩選分析，作者鑒定到1000多個(gè)的高置信度m⁷G修飾和QKI結(jié)合的mRNA結(jié)合位點(diǎn)，這些位點(diǎn)具有保守的 "GANGAN（N=A/C/U/G）"motif序列。更為重要的是，在應(yīng)激條件下，QKI7（通過C端）與應(yīng)激顆粒（SG）核心蛋白G3BP1相互作用，并將內(nèi)部發(fā)生m⁷G修飾的轉(zhuǎn)錄本穿梭到SG中，以調(diào)節(jié)mRNA的穩(wěn)定性和翻譯。QKI7通過減弱了Hippo信號(hào)通路中重要基因的翻譯效率，使得癌細(xì)胞對(duì)化療敏感?？偟膩碚f，作者發(fā)現(xiàn)一種RNA修飾調(diào)控新途徑：QKI通過結(jié)合mRNA 內(nèi)部m⁷G修飾位點(diǎn)從而調(diào)節(jié)目標(biāo)mRNA的代謝和細(xì)胞耐藥。

1、細(xì)胞質(zhì)mRNA內(nèi)部具有豐富的m7G RNA甲基化修飾

2、QKIs是mRNA內(nèi)部m⁷G甲基化修飾的結(jié)合蛋白

3、應(yīng)激條件下QKI6, QKI7與已經(jīng)蛋白G3BP1結(jié)合

4、應(yīng)激條件下QKI7將內(nèi)部發(fā)生m⁷G修飾的mRNA運(yùn)送至應(yīng)激顆粒

5、應(yīng)激條件下QKI7調(diào)控內(nèi)部發(fā)生m⁷G修飾的mRNA穩(wěn)定性及翻譯效率

二、METTL1介導(dǎo)的Arg-TCT tRNA m⁷G修飾驅(qū)動(dòng)癌基因翻譯(Mol cell, 2021)
RNA甲基轉(zhuǎn)移酶METTL1催化tRNA發(fā)生N7-甲基鳥苷（m7G）RNA甲基化修飾。作者發(fā)現(xiàn)METTL1敲除會(huì)導(dǎo)致m⁷G修飾的tRNA豐度降低，并抑制致癌。相反，METTL1過表達(dá)會(huì)誘導(dǎo)致癌細(xì)胞生長(zhǎng)和腫瘤進(jìn)展。在分子機(jī)制方面，作者發(fā)現(xiàn)m⁷G修飾的tRNA豐度增加，特別是Arg-TCT-4-1，促進(jìn)富含相應(yīng)AGA密碼子的mRNA翻譯。并且單個(gè)tRNA Arg-TCT過表達(dá)會(huì)誘導(dǎo)腫瘤惡化。METTL1介導(dǎo)的tRNA修飾通過重塑mRNA "translatome "來增加促生長(zhǎng)蛋白的表達(dá)，從而驅(qū)動(dòng)致癌轉(zhuǎn)化，表明該分子是一個(gè)很有前景的抗癌靶點(diǎn)。

1、METTL1促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及成瘤